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柳叶刀:耐药结核的诊断

表型检测


根据培养的表型药物敏感性测试(DST)可以测量细菌对药物的敏感性。常规DST通常使用单一临床药物浓度根据定性方法评估体外生长。这个结果报告敏感菌和耐药菌,并且精确性通常低于半定量方法,半定量方法是在一系列药物浓度下培养细菌,可以确定MIC。半定量数据具有治疗意义,因为它区分易感和耐药菌株,并且还检测中水平或低水平耐药,此时增加药物剂量可能有益于患者。


从临床角度来说,DST的主要缺点是获得结果需花费时间。为了提高检测速度,可以直接筛查临床标本以便于避免分离和预培养之间发生延迟。但是,这仅适用于少量药物,并且不适用于测量MIC。


基因检测


基因检测可以预测对药物的耐药性,但不确定敏感性,并且阴性基因检测结果通常报告为无耐药性。


Xpert MTB/RIF


Xpert MTB / RIF是一种易于使用的基于PCR的自动化诊断结核病并检测突变的技术,可在2小时内预测对利福平耐药性。这种诊断技术在2010年通过WHO的认可,并推荐作为评估治疗MDR结核的一线诊断测试方法。


线性探针测定(LPA)


除GeneXpert技术外,WHO还认可LPA分子诊断技术检测耐药性。扩增目标基因后,技术将样品反向杂交到一系列固定在膜上的寡核苷酸探针中。应用最广的研究测试是GenoType MTBDRplus 用于利福平和异烟肼耐药分析,GenoType MTBDRsl-v1.0用于氟喹诺酮,氨基糖苷类,和乙胺丁醇耐药分析。


补偿突变


评估多态性对药物效应作用的挑战之一是补偿性突变的累积。这些变化可以消除细菌耐药突变的负面影响,恢复健康和给予选择性优势。基因组的这些补偿性变化可能与耐药强相关,但不是因果关系,因此,不应用于诊断细菌耐药性。


值得注意的是,表型检测不受补偿性突变的影响。


耐药水平的鉴别


MIC的表型鉴别显示出细菌耐药对抗结核药物的变化。由突变引起的破坏程度与基因位置,以及药物发挥作用的基因相关。增加药物剂量可以为某些低耐药的病原体提供治疗方案,因为高剂量治疗可以抵抗耐药。


测序方法


对于利福平耐药的结核患者,后续测试可确定对其他药物的耐药性,从而优化治疗方案。使用无效的二线药物可能会增加耐药性和XDR结核的出现。及时的治疗方法会降低传播机会,并可能降低发病率和死亡率。


DNA测序检测所有核苷酸位置,提供更高的精准性,有时比LPA和探针检测更节省时间和节约成本。


文献来源》》》》The epidemiology, pathogenesis, transmission, diagnosis, and management of multidrug-resistant, extensively drug-resistant, and incurable tuberculosis

 

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