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巨噬细胞怎样抗击孢子丝菌感染?

申克孢子丝菌(Sporothrix schenckii)室温下呈菌丝相,在感染部位转化为酵母相后可致病,引起皮肤黏膜、皮下组织及局部淋巴组织的感染。宿主单核巨噬细胞能够识别并吞噬、杀伤、清除入侵的申克孢子丝菌,在机体抵抗申克孢子丝菌感染中发挥重要作用。刘彩霞等探讨了申克孢子丝菌酵母相(简称酵母相)对人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)巨噬细胞样细胞p38丝裂原活化蛋白激酶 (p38MAPK)通路激活与白细胞介素6(IL-6)表达的影响。


实时荧光定量反转录PCR分析申克孢子丝菌酵母相刺激THP⁃1巨噬细胞样细胞3、6 h后IL-6 mRNA表达水平变化,酶联免疫吸附法检测刺激24 h后IL-6分泌量;Western印迹法分析2 × 106 CFU/ml申克孢子丝菌酵母相体外作用于THP⁃1巨噬细胞样细胞30 min和60 min后p38MAPK磷酸化水平的变化,同时检测100 nmol/L地塞米松(p38MAPK抑制剂)预处理THP-1巨噬细胞样细胞30 min后p38MAPK磷酸化水平及IL-6 mRNA表达水平的变化。


刺激THP-1巨噬细胞样细胞3 h后,酵母相组、凝胶多糖组、空白对照组IL-6 mRNA表达水平分别为56.81 ± 7.36、26.69 ± 1.22、0.97 ± 0.05,刺激6 h后分别为378.03 ± 16.67、276.24 ± 39.13、1.02 ± 0.04,组间差异有统计学意义(F = 5 552.22,P < 0.001),申克孢子丝菌酵母相刺激6 h后IL-6 mRNA表达高于刺激3 h后(q = 16.74,P < 0.001)。申克孢子丝菌酵母相与THP-1巨噬细胞样细胞共孵育24 h后,酵母相组、凝胶多糖组及空白组细胞上清液中IL-6浓度分别为(59.96 ± 18.16)、(91.01 ± 17.27)、(5.50 ± 2.30) pg/L,组间差异有统计学意义(F = 26.62,P < 0.01),酵母相组高于空白对照组(P < 0.01)。地塞米松处理后,酵母相组IL⁃6 mRNA表达水平(4.46 ± 1.03)低于未用地塞米松处理组(493.52 ± 113.87,P < 0.001)。申克孢子丝菌酵母相作用THP-1巨噬细胞样细胞30、60 min后,磷酸化p38MAPK蛋白相对表达量均高于空白对照组(P < 0.01)。地塞米松预处理THP-1巨噬细胞样细胞后,磷酸化p38MAPK水平低于未用地塞米松处理组,差异有统计学意义(q = 10.81,P < 0.01)。


人THP-1巨噬细胞样细胞体外与申克孢子丝菌酵母相作用后,通过激活p38MAPK信号通路促进IL⁃6表达。


 

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