生命经纬专题
  [前言] 显微镜是实验室最常用的仪器之一。本专题在普通光学显微镜的基础上,为您介绍荧光显微镜电子显微镜免疫电镜的基本原理、种类及操作指南

  荧光显微镜也是光学显微镜的一种,主要的区别是二者的激发波长不同。由此决定了荧光显微镜与普通光学显微镜结构和使用方法上的不同。

显微镜的基本光学原理

   透镜组合和折射率。
   显微镜之所以能将被检物体进行放大,是通过透镜来实现的。单透镜成象具有象差,严重影响成象质量。因此显微镜的主要光学部件都由透镜组合而成。从透镜的性能可知,只有凸透镜才能起放大作用,而凹透镜不行。显微镜的物镜与目镜虽都由透镜组合而成,但相当于一个凸透镜。[详细]

显微镜的重要光学技术参数

   根据镜检的目的和实际情况来协调各参数的关系。
   显微镜的光学技术参数包括:数值孔径、分辨率、放大率、焦深、视场宽度、覆盖差、工作距离等等。这些参数并不都是越高越好,它们之间是相互联系又相互制约的,在使用时,应根据镜检的目的和实际情况来协调参数间的关系,但应以保证分辨率为准。[详细] 

显微镜的光学附件

   物镜,目镜,聚光镜和照明装置
   显微镜的光学部件包括物镜,目镜,聚光镜及照明装置几个部分。各光学部件都直接决定和影响光学性能的优劣。本文为您详细介绍各个光学附件的性质及显微镜光轴的调节方法。[详细]

显微镜检术分类
    正立式显微镜、偏光显微镜、 倒置显微镜和体视显微镜的镜检术
   在生物研究领域,透射式明场显微镜得到广泛应用,在此基础上各种特殊的镜检方法也得到应用,如相衬,荧光,干涉,暗场,这些镜检方法在 一些高档显微镜上均能同时实现。[详细]
荧光显微镜的结构和主要部件
    光源、滤色系统、反光镜、聚光镜、目镜、物镜和落射光装置
   荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。[详细]
荧光显微镜标本制作要求

  包括载玻片、盖玻片和标本的厚度要求,封裱剂和镜油的选择。[详细]

荧光显微镜基本操作

  1.关闭房间内的电灯,开启显微镜汞灯;2.根据样品标记的荧光素选择相应的滤光片;3.放好样品,找到合适的视野;4.如需拍照,请确认照相机内已装好彩色胶卷;5.开启自拍装置,选择手动档,通常拍摄速度在0.5---10秒内;6.使用结束,关闭所有电源并做好使用记录。[详细]

荧光显微镜操作程序

  1. 开机  2.调试显微镜光路  3. 调试数码相机拍摄照片  4. 关机  [详细]

使用荧光显微镜的注意事项

  (1)严格按照荧光显微镜出厂说明书要求进行操作,不要随意改变程序。(2)应在暗室中进行检查。进入暗室后,接上电源,点燃超高压汞灯5~15min,待光源发出强光稳定后,眼睛完全适应暗室,再开始观察标本。(3)防止紫外线对眼睛的损害,在调整光源时应戴上防护眼镜。……[详细]

荧光图像的记录方法

  荧光显微镜所看到的荧光图像,一是具有形态学特征,二是具有荧光的颜色和亮度,在判断结果时,必须将二者结合起来综合判断……[详细]

电子显微镜的原理

  电子显微镜是一种电子仪器设备,可用来详细研究电子发射体表面电子的放射情形。电子显微镜有两大类:(1)发射型。(2)电磁、静电扫描型。前者用于研究电子放射现象;后者用以增加普通光学显微镜的应用范围。[详细]

透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM)
   1932年Ruska发明了以电子束为光源的透射电子显微镜,电子束的波长要比可见光和紫外光短得多,并且电子束的波长与发射电子束的电压平方根成反比,也就是说电压越高波长越短。目前TEM的分辨力可达0.2nm。[详细]
扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope,SEM)

  扫描电子显微镜用来观察标本的表面结构。其工作原理是用一束极细的电子束扫描样品,在样品表面激发出次级电子,次级电子由探测体收集,再经光电倍增管和放大器转变为电信号来控制荧光屏上电子束的强度,显示出与电子束同步的扫描图像。图像为立体形象,反映了标本的表面结构。[详细]

扫描隧道显微镜(Scanning Tunneling Microscope,STM)
  扫描隧道显微镜由Binnig等1981年发明,根据量子力学原理中的隧道效应而设计。当原子尺度的针尖在不到一个纳米的高度上扫描样品时,此处电子云重叠,外加一电压(2mV~2V),针尖与样品之间产生隧道效应而有电子逸出,形成隧道电流。它的优点是三态(固态、液态和气态)物质均可进行观察。[详细]
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免疫电镜的原理及影响因素

   免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术,即采用抗原抗体凝集反应后,再经负染色直接在电镜下观察;另一类则是免疫电镜定位技术。[详细]

酶免疫电镜技术

  酶免疫电镜技术是利用酶的高效率的催化作用对其底物的反应形成不同的电子密度,借助于电子显微镜观察,证明酶的存在,从而对抗原进行定位。 [详细]

铁蛋白免疫电镜技术

  免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体,再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。[详细]

非标记抗体免疫电镜技术

   不标记抗体法可以避免一些不利影响因素,通过一系统的非标记抗体的免疫学反应,对组织中的抗原进行定位检测。不标记抗体法又可分为用标记物显示和不同标记物显示两种方法。[详细]

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